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大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒(CTAB沉淀法)
产品货号:
产品规格:50T/T
产品简介:
大肠杆菌(Escherichiacoli,E.coli)属于革兰氏阴性短杆菌,大小0.5×1~3微米周生鞭毛,能运动,无芽孢,能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,几乎占粪便干重的1/3.获得DNA的量很高,但是纯度一般,但足够用于大多数分子生物学实验。大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒CTAB沉淀法是简便的利用CTAB取大肠杆菌基因组DNA的试剂盒,其提取原理是利用蛋白酶K消化蛋白,CTAB沉淀多糖,再经加热使蛋白变性与DNA分离,乙醇沉淀核酸获得基因组DNA,可进行酶切、PCR等下游实验。该试剂盒仅用于科研领域,不用于临床诊断或治疗。产品组成:
操作步骤:
1.准备工作:取TEbuffer,加至蛋白酶K中,充分混匀,配制成20mg/ml的白酶K溶液,可分装成小份,20保存1年有效。2.取菌液置于EP管中,离心,弃上清液。再次加入1.5m菌液,重复该步骤一次。3.加入Eco裂解液和3μl白酶K溶液(20mg/ml),充分混匀,37℃孵育1h。4.加入CTAB沉淀液,充分混匀,65℃孵育10min5.加入蛋白清除液,充分混匀,g离心5~10min6.转移上清至新EP管中,加入2倍体积的Eco漂洗液,混匀,20℃放置30min或过夜。7.g离心10min,弃上清液,加入70%乙醇洗涤沉淀8.g离心10min,弃上清液,室温干燥DNA沉淀,加入或适量TEbuffer溶解沉淀,20℃保存。TEbuffer体积越大,DNA浓度越低。注意事项:
1.用于裂解的噬菌体、宿主菌越新鲜,裂解越好,收获量越大。2.为了您的安全和健康,请穿戴一次性手套操作。有效期:6个月有效。